Pagrindinis skirtumas - nitroceliuliozė ir nailono membrana
Blotavimas yra svarbi metodika nustatant specifines DNR, RNR ir baltymų sekas iš jų mišinių molekulinėje biologijoje. Tai atliekama naudojant membraną, vadinamą blot. Yra įvairių blotavimo būdų, tokių kaip šiaurinis, pietinis ir vakarinis blotingas. Kad būtų išvengta nespecifinio rišimosi ir neteisingo aptikimo, blotingo procesui reikia pasirinkti tinkamą membraną. Blotavimo metoduose dažniausiai naudojamos membranos yra nitroceliuliozė, nailonas ir PVDF. Jie turi skirtingas savybes. Pagrindinis skirtumas tarp nitroceliuliozės ir nailono membranos yra tas, kad nitroceliuliozės membranos turi didelį baltymų imobilizavimo potencialą, o nailono membranos - didelį nukleino rūgščių imobilizavimo potencialą. Tačiau abiejų tipų membranos dažnai naudojamos blotingo metoduose.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra nitroceliuliozės membrana
3. Kas yra nailono membrana
4. Šoninis palyginimas - nitroceliuliozė ir nailono membrana
5. Santrauka
Kas yra nitroceliuliozės membrana?
Nitroceliuliozės membrana yra dažniausiai naudojamas membranos filtras taikant nukleorūgščių ir baltymų baltymo metodus. Jis pasižymi dideliu baltymų jungimosi potencialu. Vadinasi, nitroceliuliozės membranos plačiai naudojamos Western blot technikoje. Nitroceliuliozės membranos yra suderinamos su visais hibridizacijos metodais ir pasižymi puikiu rišimosi pajėgumu be trukdžių. Nitroceliuliozės membranos yra natūraliai hidrofilinio pobūdžio. Jie daro hidrofilinę sąveiką su molekulėmis ir efektyviai imobilizuoja jas ant membranos. Komercinės nitroceliuliozės membranos yra dviejų porų dydžio: 0,45 ir 0,2 µm.
01 pav. Nitroceliuliozės membrana, naudojama atliekant vakarų blotavimą
Kas yra nailono membrana?
Nailono membrana yra dar viena komercinių membranų rūšis, naudojama blotavimo metoduose. Alternatyviai jis naudojamas su nitroceliuliozės membranomis pietiniam ir šiauriniam blotavimui. Dėl didelio afiniteto prisijungti prie DNR nailono membranos idealiai tinka pietų tyrimui nei nitroceliuliozė. Dėl kelių unikalių nailono membranų ypatumų tyrėjai dažniausiai naudoja nailono membranas pietų ir šiaurės blotavimui vietoj nitroceliuliozės membranos. Nailono membranos taip pat yra rekomenduojamos nuplėšti ir atnaujinti, skirtingai nei nitroceliuliozė.
02 paveikslas: Nailono membrana, naudojama pietiniam blotavimui
Kuo skiriasi nitroceliuliozė nuo nailono membranos?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
Nitroceliuliozė ir nailono membrana |
|
| Nitroceliuliozės membranos yra trapios. | Nailono membranos yra mažiau trapios. |
| Tvarkymas | |
| Juos sunku valdyti. | Juos lengva valdyti. |
| Reprobingas | |
| Nepalaikomas nitroceliuliozės membranas sunku papildyti. | Nailoninėmis membranomis lengva atnaujinti. |
| Suderinamumas su įvairiomis laikymo sąlygomis | |
| Nitroceliuliozės membranos turi mažiau stiprumo, kad atlaikytų įvairias laikymo sąlygas. | Nailono membranos tvirčiau reaguoja į įvairias laikymo sąlygas. |
| Naudokite | |
| Būtina pateikti iš anksto. | Nailoninėms membranoms iš anksto nereikia klijuoti. |
| Hidrofilinė gamta | |
| Nitroceliuliozės membranos yra hidrofilinio pobūdžio, tačiau yra mažiau hidrofiliškos nei nailono membranos. | Jie yra labai hidrofilinio pobūdžio. |
| Imobilizavimo potencialas | |
| Nitroceliuliozės membranos turi mažiau afiniteto nukleino rūgštims. Bet jis turi didelį afinitetą baltymams. | Nailono membranos turi didelį jungimosi potencialą su nukleorūgštimis nei nitroceliuliozės membranos. |
Santrauka - nitroceliuliozė ir nailono membrana
Nitroceliuliozė ir nailono membranos yra specialūs lakštai, naudojami blotavimo technikoje, norint atkurti juostos raštą ant gelio. Jie suteikia galimybę aptikti specifinę seką arba baltymą iš mišinių, imobilizuojant juos ant membranos. Kai molekulės imobilizuojamos ant membranos, ją galima naudoti kaip substratą hibridizacijos analizei su paženklintais zondais. Nitroceliuliozės membrana dažniausiai naudojama baltymams aptikti taikant Western blot techniką dėl didelio prisijungimo prie baltymų afiniteto. Nailono membranos dažnai naudojamos pietiniam ir šiauriniam blotavimui. Tuo skiriasi nitroceliuliozė ir nailono membrana.
