Pagrindinis skirtumas - gelio sukrovimas ir atskyrimo gelis
Terminai „sukraunamasis gelis“ir „atskyrimo gelis“vartojami paaiškinant SDS-PAGE techniką. SDS-PAGE arba natrio dodecilsulfato-poliakrilamido gelio elektroforezė yra laboratorijos metodas, naudojamas baltymų molekulėms atskirti pagal jų molekulinį svorį. Technikos teorija yra ta, kad skirtingo molekulinio svorio baltymai rodo skirtingą migracijos greitį; mažos molekulinės masės molekulės migruoja greičiau, o didelės molekulinės masės - lėtai. Migracijos terpė yra gelis. Yra dviejų tipų geliai, vadinami sukraunamuoju geliu ir atskiriamuoju geliu. Pagrindinis skirtumas tarp sukraunamo gelio ir skiriamojo gelio yra tas, kad sukraunamo gelio pH yra 6,8, o skiriamojo gelio - 8,8.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra gelio įdėjimas
3. Kas yra gelio atskyrimas
4. Ryšys tarp gelio sukrovimo ir gelio atskyrimo
5. Šoninis palyginimas - gelio sukrovimas ir gelio atskyrimas lentelių pavidalu
6. Santrauka
Kas yra „Stacking Gel“?
Stacking gel yra mažai koncentruotas poliakrilamido gelis, kuris dedamas ant labiau koncentruoto skiriamojo gelio (skiriamojo gelio) viršaus SDS-PAGE technika. Kraunamasis gelis naudojamas pagerinti elektroforezės skiriamąją gebą. Skiriamoji geba padidėja dėl skirtumo tarp sukraunamo gelio ir skiriamojo gelio koncentracijų, turinčių įtakos mėginio baltymams. Kadangi poliakrilamido koncentracija kaupimo gelyje yra maža, porų dydis yra didesnis. Tai taip pat padeda didinti atskyrimą.
Kraunamasis gelis yra birus poliakrilamido gelis, kurio poros yra apie 7% poliakrilamido. Šios poros neveikia kaip didelė kliūtis didelėms baltymų molekulėms. Taigi šis gelis šiek tiek veikia šių baltymų mobilumą. Tai išskiria pagal baltymų mobilumą ir dydį, sutelkiant juos tarp dviejų gelių.
01 paveikslas: SDS-PAGE akrilamido gelis
Sukraunamo gelio pH yra 6,8. Jo pH yra rūgštus nei skiriant gelį 2 pH vienetais. Šis pH reiškia mažesnę joninę jėgą, taigi ir didesnę elektrinę varžą. Tai išprovokuoja baltymų mobilumą nei kitos įkrautos dalelės, esančios gelyje.
Kas yra atskiriamasis gelis?
SDS-PAGEtechnique gelio atskyrimas arba skiriamasis gelis yra labai koncentruotas poliakrilamido gelis, dedamas ant mažai koncentruoto sukraunamo gelio viršaus. Skiriamajame gelyje yra didelis kiekis poliakrilamido (10%). Šio gelio pH palaikomas kaip 8,8, kuris yra aukštesnis nei sukraunamo gelio pH.
02 paveikslas: Gelio elektroforezės aparatas
Kai baltymo molekulės pasiekia atskyrimo gelį, tų molekulių migracija sulėtėja, nes išskiriamasis gelis yra didelės koncentracijos gelis su mažu porų dydžiu, kuris gali veikti kaip didelė kliūtis baltymo molekulių judėjimui. Dėl šio sulėtėjimo kiti baltymai lėtai migruoja pasivyti, todėl tarp dviejų gelių susidaro siaura, koncentruota juosta.
Koks yra gelio sukrovimo ir gelio atskyrimo ryšys?
Tame pačiame aparate naudojami tiek „Stacking Gel“, tiek „Separating Gel“tipai
Koks skirtumas tarp gelio sukrovimo ir gelio atskyrimo?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
Gelio sukrovimas vs atskyrimo gelis |
|
| Stacking gel yra mažai koncentruotas poliakrilamido gelis, kuris dedamas ant labiau koncentruoto skiriamojo gelio (skiriamojo gelio) viršaus SDS-PAGE technika. | SDS-PAGE technikos atskyrimo gelis arba skiriamasis gelis yra labai koncentruotas poliakrilamido gelis, dedamas ant mažai koncentruoto sukraunamo gelio viršaus. |
| Vieta | |
| Kietinimo gelis dedamas ant skiriamojo (skiriamojo) gelio. | Atskiriamasis gelis dedamas ant indo, naudojamo gelio elektroforezei, dugno. |
| Susikaupimas | |
| Sukraunamo gelio koncentracija yra didelė. | Skiriamojo gelio koncentracija yra maža. |
| Poliakrilamido kiekis | |
| Pakavimo gelyje yra apie 7% poliakrilamido. | Atskyrimo gelyje yra apie 10% poliakrilamido. |
| pH | |
| Sukraunamo gelio pH yra 6,8. | Atskyrimo gelio pH yra 8,8. |
| Poros dydis | |
| Didelio porų dydis yra sukraunamame gelyje. | Mažas porų dydis yra skiriamajame gelyje. |
| Rezoliucija | |
| Stacking gel suteikia geresnę skiriamąją gebą. | Gelio atskyrimas suteikia blogą skiriamąją gebą. |
Santrauka - gelio sukrovimas prieš gelio atskyrimą
Kraunamasis gelis ir atskyrimo gelis yra dviejų tipų poliakrilamido geliai, naudojami norint geriau atskirti baltymo molekules tam tikrame mėginyje. Skirtumas tarp sukraunamo gelio ir skiriamojo gelio yra tas, kad sukraunamo gelio pH yra 6,8, o skiriamojo gelio - 8,8.
