Pagrindinis skirtumas - „Gram Stain“ir „Acid Fast“
Bakterijos yra labai maži mikroorganizmai. Jie yra skaidrūs, juos sunku aptikti esant gyvenimo ir netepimo sąlygoms. Taigi, siekiant palengvinti bakterijų aptikimą, yra sukurti įvairūs dažymo metodai. Yra trys pagrindinės dažymo technikos rūšys: paprastas dažymas, diferencinis dažymas ir struktūrinis dažymas. Diferencinis dažymas yra būdas, kai bakterijoms atskirti naudojamas daugiau nei vienas dėmelis. Gramo dėmė ir greitai rūgštimi pasižyminti dėmė yra populiariausiai vadinamos diferencinėmis dėmėmis. Gramo dažymas yra diferencinė dažymo technika, kuri bakterijas atskiria į dvi grupes, žinomas kaip gramteigiamos ir gramneigiamos. Deguonis be rūgščių yra diferencinė dėmė, naudojama greitai rūgštims neturintiems organizmams, tokiems kaip Mycobacterium, nustatyti iš nerūgščių organizmų. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp „Gram“ir „Acid Fast“dažų.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra „Gram Stain“
3. Kas yra greitas
rūgštumas 4. „Gram Stain“ir „Acid Fast“panašumai
5. Gretimas palyginimas - „Gram Stain“ir „Acid Fast“lentelių pavidalu
6. Santrauka
Kas yra „Gram Stain“?
Gramo dėmė yra svarbi diferencinio dažymo technika, naudojama bakterijoms identifikuoti mikrobiologijoje. Šią techniką 1884 m. Pristatė danų bakteriologas Hansas Christianas Gramas. Gramo dažymas bakterijas skirsto į dvi pagrindines grupes, kurios vadinamos gramteigiamomis ir gramneigiamomis, kurios yra labai svarbios bakterijų klasifikacijai ir identifikavimui. Tyrimų metu mikrobiologai atlieka gramų dažymą kaip pradinį bakterijų apibūdinimo žingsnį.
Bakterijos yra grupuojamos pagal jų ląstelių sienelių skirtumus. Gram teigiamos bakterijos susideda iš storo peptidoglikano sluoksnio jų ląstelių sienelėje, o gramneigiamos bakterijos - iš plono peptidoglikano sluoksnio jų ląstelių sienelėje. Gramo dažymo rezultatas bus pagrįstas ląstelės sienos peptidoglikano sluoksnio storio skirtumu.
Gramų dažymas atliekamas naudojant keturis skirtingus reagentus, būtent; pagrindinė dėmė, marinantis, spalvą mažinantis agentas ir priešinis dažymas. Krištolinė violetinė ir safraninas naudojamos atitinkamai kaip pagrindinės ir priešinės dėmės, tuo tarpu gramai jodo ir 95% alkoholio - atitinkamai kaip kandiklis ir dažiklis. Pagrindiniai gramų dėmių žingsniai yra tokie;
- Ant švaraus stiklo stiklelio paruošiamas bakterijų tepinėlis, užfiksuojamas ir atvėsinamas.
- 1–2 minutes tepinėlis užpilamas krištolo violetine spalva.
- Tepinėlis skalaujamas lėtai tekančiu vandentiekio vandeniu, kad būtų pašalintos perteklinės dėmės.
- 1 minutę tepinėlis tepamas gramų jodu.
- Tepalas nuplaunamas lėtai tekančiu vandentiekio vandeniu
- 2–5 sekundes tepinėlis plaunamas 95% alkoholio ir nuplaunamas lėtai tekančiu vandentiekio vandeniu.
- Tepinėlis prieš minutę dažomas safraninu
- Tepinėlis nuplaunamas lėtai tekančiu vandentiekio vandeniu, džiovinamas ir stebimas mikroskopu.
Gramo dėmės pabaigoje gramneigiamos bakterijos bus pastebėtos rausvos spalvos, o gramteigiamos bakterijos - purpurinės spalvos.
01 paveikslas: gramneigiamos ir gramteigiamos bakterijos
Gramų dėmės rezultatas nustatomas pagal peptidoglikano sluoksnio storį jų ląstelių sienelėje. Spalvinimo etapo metu pagrindinė dėmė ir kandikas lengvai pašalinami iš gramneigiamų bakterijų ir tampa bespalviai, nes jie turi ploną peptidoglikano sluoksnį. Pirminė dėmė lieka gramteigiamose bakterijose, nes jos turi storą peptidoglikano sluoksnį. Kontrolinis dažymas nebus veiksmingas gramteigiamoms bakterijoms dėl pirminės dėmės išlaikymo. Taigi gramų teigiamos bakterijos bus matomos pagrindinės dėmės spalvos, tai yra violetinės spalvos. Kontrolinė dėmė nudažys gramneigiamas bakterijas, ir jos bus matomos pasirinktos spalvos, tai yra safranino spalva. Taigi bakterijas lengva suskirstyti į dvi grupes pagal gramo dėmę ir tai yra naudinga diferencijuojant ir identifikuojant bakterijas.
Kas yra „Acid Fast“?
Atsparumas rūgštims yra fizinė tam tikrų bakterijų savybė, ypač jų atsparumas dažymo procedūrų metu atsirandančioms rūgštims. Kai nudažyti, šie organizmai atsispiria praskiestomis rūgštimis ir (arba) etanoliu pagrįstomis spalvinimo procedūromis, įprastomis daugelyje dažymo protokolų. Taigi šiems organizmams suteikiamas pavadinimas „greitai rūgštus“. Ši savybė parodyta dėl to, kad jų ląstelių sienelėse yra didelis vaškinės medžiagos (mikolio rūgščių) kiekis. Šis tyrimas yra labai svarbus norint nustatyti Mycobacterium tuberculosis.
2 paveikslas: rūgštinės greitai mikobakterijos
Šią greitai rūgštinę dėmę sukūrė Paulas Ehrlichas 1882 m.. Ehrlicho greito rūgšties metodą modifikavo Ziehl-Neelsen ir dabar ji naudojama dažniau. Greito rūgštinio dažymo procedūra apima tris skirtingus reagentus. Kaip pagrindinis dėmuo naudojamas karbolio fuschinas. Rūgštus alkoholis naudojamas kaip spalvą mažinanti medžiaga. Metileno mėlynasis naudojamas kaip priešingas dėmuo. Dažymo procedūra atliekama taip.
- Pirminė dėmė (karbolio fuksinas) uždedama ant fiksuoto bandinio ant stiklelio (visos ląstelės bus nudažytos raudona spalva).
- Slydimas kaitinamas garuojant 5 minutes, todėl dėmės tinkamai įstumia į ląsteles.
- Tada pridedamas spalvą mažinantis tirpalas (tai pašalina raudonus dažus iš visų ląstelių, išskyrus rūgštines bakterijas).
- Metileno mėlynas pridedamas kaip priešingas dažymas (jis nuspalvina visas nusidažiusias bakterijų ląsteles).
- Greitai rūgštingos bakterijos išlieka raudonos, o nerūgštinės - mėlynai.
Kokie yra graminio beico ir greito rūgšties panašumai?
- „Gram“dažymas ir „Acid fast“yra du skirtingi dažymo būdai.
- Abiem būdais bakterijos skirstomos į dvi grupes.
- Abiejuose metoduose naudojamos dvi dėmės ir viena spalva.
Koks skirtumas tarp gramo dėmių ir rūgščių greitai?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
Gramo dėmės ir rūgštys greitai |
|
| Gramo dažymas yra diferencinė dažymo technika, kuri bakterijas atskiria į dvi gramteigiamų ir gramneigiamų bakterijų grupes. | „Acid Fast“dėmė yra diferencinė dėmė, naudojama greitai rūgštims atspariems organizmams identifikuoti iš nerūgščių organizmų. |
| Pirminis dėmelis | |
| Krištolinė violetinė spalva dažniausiai naudojama dažant gramais. | Karbolio fuksinas yra pagrindinė dėmė, naudojama greitai rūgštyje. |
| Spalvą mažinantis agentas | |
| 95% alkoholio naudojamas kaip dažų pašalinimo priemonė gramų dėmėse. | Rūgštus alkoholis yra naudojamas kaip rūgštį greitai pašalinanti medžiaga. |
| Skaitliukas Dėmelis | |
| Gramo dėmėje kaip priešinis dėmuo naudojamas safraninas. | Greitai rūgštinant dažyti kaip metileno mėlyną kaip priešingą dėmę. |
| Stebėjimas | |
| Gramneigiamos bakterijos pastebimos nuskintos spalvos, o gramteigiamos - purpurinės. | „Acid Fast“bakterijos pastebimos raudonos spalvos, o nerūgštinės - mėlynos spalvos. |
Santrauka - „Gram Stain“ir „Acid Fast“
Gyvosios būsenos mikroorganizmus vizualizuoti sunku. Todėl jų savybėms tirti plačiai naudojamos biologinės dėmės ir dažymo procedūros. Diferencinis dažymas yra vienas iš dažymo būdų, naudojamų bakterijoms atskirti. Gramo dažymas ir greitas rūgštinis dažymas yra du skirtingi dažymo būdai. Gramo dažymas atskiria gramneigiamas ir gramteigiamas bakterijas pagal jų ląstelių sienelių storį. Greitas dažymas rūgštimi išskiria greitai rūgštis neturinčias bakterijas, atsižvelgiant į mikolio rūgšties kiekį ląstelių sienelėje. Tai yra skirtumas tarp greitai rūgštinės ir graminės dėmės.
Atsisiųskite „Gram Stain“ir „Acid Fast“PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia Skirtumas tarp „Gram Stain“ir „Acid Fast“.
