Pagrindinis skirtumas - HPLC ir LCMS
Pirmiausia pažvelkime į HPLC ir LCMS prasmę, prieš analizuodami skirtumą tarp HPLC ir LCMS. Chromatografija yra atskyrimo technika atliekant cheminę analizę, kai mėginio sudedamosios dalys yra atskiriamos praeinant per chromatografinę terpę. Tai taip pat apima sąveiką su mėginiu, stacionarią fazę ir judriąją fazę. HPLC reiškia didelio efektyvumo skysčių chromatografiją, ir ji naudojama kaip skysčių chromatografijos metodas analitinėje chemijoje. Skysčių chromatografijos ir masių spektroskopijos (LCMS) derinys buvo sukurtas pasirinktų biomolekulių kiekybinei analizei atlikti, ir tai yra labai jautri, tiksli ir specifinė tyrimo procedūra, palyginti su HPLC. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir LCMC. Šis straipsnis supažindins jus su HPLC ir LCMC, kurie užsiima chemine analize ir aptaria skirtumus tarp HPLC ir LCMS.
Kas yra HPLC?
Didelio efektyvumo skysčių chromatografija (HPLC) yra populiari analitinės chemijos atskyrimo technika. Jis daugiausia naudojamas komponentams atskirti, kiekvienam mišinio komponentui identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti. Anksčiau šis metodas buvo žinomas kaip aukšto slėgio skysčių chromatografija, nes nuo siurblių priklausė suslėgtas skystas tirpiklis, susidedantis iš mėginio mišinio, per kolonėlę, supakuotą kieta adsorbuojančia medžiaga. Kiekviena mėginio mišinio sudedamoji dalis skirtingai sąveikauja su kieta adsorbuojančia medžiaga, todėl skirtingų sudedamųjų dalių srautas yra skirtingas. Tai gali lemti komponentų atskyrimą, kai jie išteka iš HPLC kolonos.
HPLC buvo naudojamas įvairioms reikmėms, tokioms kaip vitamino D koncentracijos kraujyje analizė, neteisėtas narkotikų vartojimas sportininkams nustatant narkotikų likučius jų šlapime, rūšiuojant sudėtingo biologinio mėginio sudedamąsias dalis tyrimų tikslais ir analizuojant bei gaminant vaistus.
Kas yra LCMS?
Skysčių chromatografija – masių spektrometrija (LCMS) yra analitinė technika, sujungianti skysčių chromatografijos fizinio atskyrimo sugebėjimus su masių spektrometrijos (MS) masės analizės sugebėjimais. Skysčių chromatografija yra atskyrimo technika, o krūvio dalelių masės ir krūvio santykiui analizuoti naudojama masių spektrometrija. Fizinis atskyrimas paprastai pasiekiamas HPLC, arba LCMS, taip pat žinomas kaip HPLC-MS. LCMS yra dominuojanti analitinė technika, kurios tikslumas, jautrumas ir specifiškumas yra labai didelis, palyginti su HPLC. Taigi, ji yra naudinga daugelyje programų, tokių kaip moksliniai tyrimai, vaistų analizė, maisto analizė ir kt. LCMS daugiausia naudojama atskirti, aptikti, identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti konkretaus mėginio biochemines savybes esant sudėtingiems cheminiams mišiniams.
Kuo skiriasi HPLC ir LCMC?
HPLC ir LCMC akronimas ir apibrėžimas
HPLC: HPLC reiškia didelio našumo skysčių chromatografiją. Tai atskyrimo technika, kuri daugiausia naudojama komponentams atskirti, kiekvienam mišinio komponentui identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti.
LCMS: LCMS reiškia skysčių chromatografiją ir masių spektrometriją. Tai analitinė technika, sujungianti skysčių chromatografijos fizinio atskyrimo sugebėjimus su masių spektrometrijos (MS) masės analizės sugebėjimais.
HPLC ir LCMC charakteristikos
klasifikacija
HPLC: tai tik skysčių chromatografijos metodas.
LCMS: tai yra skysčių chromatografijos metodo ir masių spektrometrijos metodo derinys.
Efektyvumas
HPLC: lyginant su LCMS, HPLC analizė yra mažiau efektyvi ir lėtesnė.
LCMS: palyginus su HPLC, LCMS analizė yra efektyvi ir greitesnė.
Jautrumas
HPLC: lyginant su LCMS, HPLC analizė yra mažiau jautri.
LCMS: palyginus su HPLC, LCMS analizė yra jautresnė.
Specifiškumas
HPLC: lyginant su LCMS, HPLC analizė yra mažiau specifinė.
LCMS: lyginant su HPLC, LCMS analizė yra tikslesnė.
Tikslumas
HPLC: nustatant kai kurias chemines medžiagas, HPLC rezultatai yra mažiau tikslūs nei LCMS.
LCMS: LCMS pateikia tikslesnius rezultatus nei HPLC nustatant kai kurias chemines medžiagas.
Komponentas
HPLC: HPLC galima laikyti LCMS sudėtine dalimi.
LCMS: LCMS negali būti laikoma HPLC sudėtine dalimi.
Jonų šaltinis
HPLC: jonų šaltinio nėra HPLC instrumente.
LCMS: Jonų šaltinis yra LCMS instrumente.
Programos
HPLC: Jonus, polimerus, organines molekules ir biomolekules galima analizuoti naudojant HPLC.
LCMS: galima analizuoti organines molekules ir biomolekules. Skirtingai nei HPLC, LCMS galima naudoti tiriant nepilnai išsiskyrusius mišinius.
Operacija
HPLC: HPLC prietaiso schema pateikta 1 paveiksle, ir joje paprastai yra automatinis imtuvas, siurbliai ir detektorius. Mėginių ėmėjas įneša mėginio mišinį į judamąją fazę (suslėgtą tirpiklių, tokių kaip vanduo, acetonitrilas ir (arba) metanolis, mišinį), kuris jį perkelia į koloną. Siurbliai per kolonėlę perduoda norimą judančios fazės srautą ir sudėtį. Kolonėlė užpildyta adsorbentu, kuris yra grūdėta kieta dalelė, pavyzdžiui, silicio dioksidas ar polimerai. Detektorius sukuria signalą, proporcingą mėginio sudedamosios dalies kiekiui kolonėlėje, todėl leidžia kiekybiškai analizuoti pasirinktas mėginio sudedamąsias dalis. HPLC prietaisas yra valdomas, o duomenų analizę teikia skaitmeninis mikroprocesorius ir vartotojo programinė įranga.
1 paveikslas: HPLC prietaiso schema
LCMS: LCMS prietaiso schema pateikta 2 paveiksle. Mėginio ekstraktas įterpiamas į kolonėlę, kurią sudaro HPLC. Šioje skiltyje išlieka metabolitų mėginiai, pagrįsti fizikiniais požymiais, o skirtingi laiko tarpai į masės spektrometrą teka skirtingi metabolitai. Masių spektroskopija naudojama dalelių masėms įvertinti, molekulės elementų išdėstymui nustatyti ir molekulių struktūroms išaiškinti. Tačiau mėginys turėtų būti jonizuojamas, kad susidarytų įelektrintos molekulės, kad būtų galima nustatyti jų masės ir krūvio santykius. Todėl vietoj HPLC prietaisų LCMS sudaro dar trys moduliai, tokie kaip geležies šaltinis, masės analizatorius ir detektorius. Jonų šaltinis gali dujų fazės mėginį paversti jonais ir masės analizatoriumi, grupuodamas jonus pagal jų mases, naudodamas elektromagnetinius laukus. Pagaliau,detektorius kiekybiškai įvertina kiekvieno mėginyje esančio jono vertes ir pateikia jų duomenis. LCMS technika gali būti naudojama tiek kokybinėms, tiek kiekybinėms programoms.
2 paveikslas: LCMS prietaiso schema
Apibendrinant galima teigti, kad HPLC yra skysčių chromatografijos metodas, o LCMS yra skysčių chromatografijos ir masių spektrometrijos derinys. Abi šios analizės metodikos turi skirtingas charakteristikas, tačiau jas galima naudoti maisto kompozicijoms, farmacijos produktams ir kitoms bioaktyvioms molekulėms nustatyti ir kiekybiškai įvertinti.
