Pagrindinis skirtumas - HPLC ir HPTLC
Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir HPTLC yra tas, kad HPLC leidžia kiekybiškai atskirti mėginius, o HPTLC neleidžia kiekybiškai atskirti mėginio komponentų.
Chromatografija yra fizinio atskyrimo metodas, naudojamas atskirti ir identifikuoti mišinio komponentus. Tiek HPLC, tiek HPTLC yra chromatografijos metodai. HPLC yra didelio efektyvumo skysčių chromatografija. HPTLC yra didelio efektyvumo plono sluoksnio chromatografija.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra HPLC
3. Kas yra HPTLC
4. Palyginimas greta - HPLC ir HPTLC lentelių pavidalu
5. Santrauka
Kas yra HPLC?
HPLC yra didelio efektyvumo skysčių chromatografija. Tai analizės metodas, naudojamas mišinio komponentams atskirti, identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti. Taikant šią metodiką, mėginys ištirpinamas tinkamame tirpiklyje. Tada tirpiklis su mėginiu praleidžiamas per tam tikro slėgio siurblį. Siurblys užpildytas kieta adsorbuojančia medžiaga. Tada kai kurie komponentai stipriai jungiasi prie absorbuojančios medžiagos, o kiti - laisvai. Dėl to komponentų srautas per siurblį skiriasi. Todėl komponentus galima lengvai atskirti.
01 paveikslas: HPLC sistema
Adsorbuojanti medžiaga, užpildanti siurblį, yra žinoma kaip stacionari fazė. Tirpiklis su ištirpintu mėginiu yra žinomas kaip judanti fazė. Šioje technikoje naudojamas siurblys vadinamas stulpeliu. Kolonėlė užpildyta adsorbuojančia medžiaga, dažniausiai silicio dioksido dalelėmis. Šių dalelių dydis gali svyruoti nuo 2-50 μm. Atskyrimo procesui įtakos turi mobiliosios fazės sudėtis ir sistemos temperatūra. Sąveika tarp nejudančios fazės ir komponento mėginyje gali būti hidrofobinė sąveika, dipolio ir dipolio sąveika, joninis ryšys ir kt.
HPLC veikimo slėgis yra žymiai didesnis nei tradicinės skysčių chromatografijos. Jis yra maždaug 50-350 barų. Skirtumas tarp skysčių chromatografijos ir HPLC yra tas, kad skysčių chromatografijoje mėginys patenka per kolonėlę gravitacijos būdu, o HPLC atveju bandinys yra slėgis per kolonėlę. Kolonos ir absorbuojančių dalelių dydis taip pat yra labai mažas, palyginti su tradicine skysčių chromatografija. Tačiau skiriamoji geba, kurią suteikia HPLC technika, yra geresnė.
Kas yra HPTLC?
HPTLC yra didelio efektyvumo plono sluoksnio chromatografija. Tai pažangi ir automatizuota tradicinio TLC forma. Ši technika suteikia efektyvią rezoliuciją per trumpą laiką. Taikant šį analizės metodą, imtis ir nuoroda gali būti analizuojami tuo pačiu metu, o tai leidžia palyginti mėginį su etalonu. Tai suteikia geresnį analizės tikslumą nei kiti chromatografijos metodai. Analizei reikia mažiau laiko. Technika yra nebrangi technika.
02 pav. Maisto dažų analizė naudojant HPTLC
HPTLC metodas yra paprastas procesas, taip pat pašalinamas mėginio paruošimo etapas (tradiciniame TLC bandinio paruošimo etapas yra įtrauktas prieš atskiriant. Šis etapas apima valymą ir sodrinimą). Tirpiklis gali būti naudojamas tiesiogiai be išankstinio apdorojimo, nors naudojant kitus chromatografijos metodus reikia atlikti išankstinį apdorojimą, pvz., Degazavimą, filtravimą ir kt.
HPTLC naudojama adsorbuojanti medžiaga yra silicio dioksidas, kurio dalelių dydis yra labai mažas. Tradiciniame TLC silicio dioksido dalelių dydis yra 5-20 μm, o HPTLC - 4-8 μm. Mėginys aplikatoriumi padengiamas HPTLC plokštele. Tai suteikia vienodą ir saugų pritaikymą. Tada plokštelės dedamos į kamerą, turinčią judamąją fazę. Kamera turėtų būti prisotinta judančiosios fazės garais. Po HPTLC proceso galima aptikti pasislinkusias vietas. Aptinkant dėmeles ant plokštelės, HPTLC metodika naudojama tinkama UV sritis arba jodo kamera.
Koks skirtumas tarp HPLC ir HPTLC?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
HPLC ir HPTLC |
|
| HPLC yra didelio efektyvumo skysčių chromatografija. | HPTLC yra didelio efektyvumo plono sluoksnio chromatografija. |
| Technika | |
| Pagal HPLC judrioji fazė su tirpikliu praleidžiama per kolonėlę, užpildytą nejudančia faze. | Atliekant HPTLC, mėginys pastebimas ant TLC plokštelės ir dedamas į kamerą, kurioje yra judanti fazė; tada mėginiui leidžiama migruoti į viršų plokštelę kartu su judančiąja faze. |
| Matavimas | |
| Atliekant HPLC, komponentų srauto per kolonėlę skirtumai naudojami komponentams atskirti mėginyje. | Atliekant HPTLC, kiekvieno mėginio komponento nuvažiuotų atstumų skirtumai naudojami norint atskirti mėginio komponentus. |
| Kiekybinis atskyrimas | |
| HPLC leidžia kiekybiškai atskirti mėginius. | HPTLC neleidžia kiekybiškai atskirti mėginių komponentų. |
Santrauka - HPLC ir HPTLC
HPLC ir HPTLC yra du chromatografiniai metodai. Pagrindinis skirtumas tarp HPLC ir HPTLC yra tas, kad HPLC leidžia kiekybiškai atskirti mėginius, o HPTLC neleidžia kiekybiškai atskirti mėginio komponentų.
