Pagrindinis skirtumas - imunofluorescencija ir imunohistochemija
Ligos diagnostika, kurioje naudojami molekuliniai biologiniai metodai, tapo nauja klinikinės laboratorijos technologijos sritimi. Tai apima visus testus ir metodus, kaip nustatyti ligą ir suprasti ligos priežastį, analizuojant DNR, RNR ar organizme ekspresuotus baltymus. Sparti molekulinės diagnostikos pažanga leido atlikti pagrindinius užkrečiamųjų ir neinfekcinių ligų tyrimus. Jie naudojami nustatant svarbiausių genų ar baltymų, susijusių su liga, sekos ar išraiškos lygio pokyčius. Imunofluorescencija (IF) ir imunohistochemija (IHC) yra dvi tokios plačiai naudojamos vėžio biologijos technikos. IF yra IHC tipas, kai monokloniniams ir polikloniniams antikūnams analizuoti naudojamas fluorescencijos aptikimo metodas, o IHC naudoja chemikalais pagrįstus metodus monokloniniams ir polikloniniams antikūnams aptikti. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp IF ir IHC.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindinis skirtumas
2. Kas yra imunofluorescencija
3. Kas yra imunohistochemija
4. Imunofluorescencijos ir imunohistochemijos panašumai
5. Šoninis palyginimas - Imunofluorescencija ir imunohistochemija lentelių pavidalu
6. Santrauka
Kas yra imunofluorescencija (IF)?
Imunofluorescencija yra aptikimo technika, kai tyrime naudojami antikūnai žymimi naudojant fluorescuojančius dažus arba fluorescuojančius baltymus. Paženklinti antriniai antikūnai gali sukelti nepageidaujamus foninius signalus; todėl IF metodika pagrįsta paties pirminio antikūno žymėjimu šiuo metu, kad aptikimo metu būtų išvengta nepageidaujamų signalų. Taikant šią metodiką, išvengiama nespecifinio jungimosi tarp pirminio ir antrinio antikūno ir jis yra greitesnis, nes nėra antrinio inkubavimo etapo. Taip pat pagerinama duomenų kokybė.
01 paveikslas: Dvigubas imunofluorescencijos dažymas BrdU, NeuN ir GFAP
Fluorochromai arba fluorescenciniai dažai yra junginiai, galintys sugerti radiaciją, geriausia - ultravioletinę spinduliuotę, kuri yra sužadinta. Kai dalelės pasiekia pagrindinę būseną iš sužadintos būsenos, jos skleidžia spinduliuotę, kurią fiksuoja ir aptinka detektorius, kad susidarytų spektras. Labai svarbu, kad fluorescencinė etiketė būtų suderinama ir stabili konkrečiai reakcijai ir kad ji būtų tinkamai konjuguota su antikūnu, kad būtų gauti tikslūs rezultatai. Vienas iš dažniausiai naudojamų fluorochromų yra fluoresceino izotiocianatas (FITC), kuris yra žalios spalvos, o absorbcijos ir emisijos smailių bangos ilgiai yra atitinkamai 490 nm ir 520 nm. Rodaminas, kitas IF naudojamas agentas, yra raudonos spalvos, jo absorbcijos ir emisijos smailių bangos ilgiai yra 553 nm ir 627 nm.
Kas yra imunohistochemija (IHC)?
IHC yra molekulinis tyrimo metodas, naudojamas siekiant nustatyti ir patvirtinti antigeno buvimą tikslinėje ląstelėje. Tikslinė ląstelė gali būti infekcinė dalelė, mikrobų sukėlėjas arba piktybinė naviko ląstelė. IHC naudoja monokloninius ir polikloninius antikūnus, kad nustatytų antigenų, esančių ant tikslinių ląstelių ląstelių paviršiaus, buvimą. Metodas pagrįstas antigeno ir antikūno prisijungimu. Aptikimo žymeklis yra konjuguotas su šiais antikūnais, siekiant nustatyti konkretaus antigeno buvimą ar nebuvimą. Šie žymenys gali būti cheminiai žymenys, tokie kaip fermentai, fluorescuojančiai pažymėti antikūnai arba radioaktyviai pažymėti antikūnai.
02 paveikslas: Pelės ir smegenų skiltelė, dažyta imunohistochemijos metodu
Populiariausias IHC taikymas yra vėžio ląstelių biologija, siekiant nustatyti piktybinių navikų buvimą, tačiau jis taip pat naudojamas infekcinėms ligoms nustatyti.
Kokie yra imunofluorescencijos ir imunohistochemijos panašumai?
- Imunofluorescencija ir imunohistochemija vyksta in vitro sąlygomis.
- Abu metodai yra pagrįsti antigenu-antikūnu
- Abi yra labai greitos technikos.
- Metodų rezultatus galima pakartoti.
- Abiejų duomenų kokybė pagerėjo.
- Šie metodai naudojami diagnozuojant vėžį ir infekcines ligas.
Koks skirtumas tarp imunofluorescencijos ir imunohistochemijos?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
Imunofluorescencija ir imunohistochemija |
|
| IF yra aptikimo technika, kai tyrime naudojami antikūnai žymimi naudojant fluorescuojančius dažus arba fluorescuojančius baltymus. | IHC yra aptikimo technika, kai tyrime naudojami antikūnai žymimi naudojant chemines medžiagas arba radioaktyviuosius elementus. |
| Tikslumas | |
| IF technikos tikslumas yra didesnis, palyginti su IHC. | IHC tikslumas yra mažesnis. |
| Specifiškumas | |
| IF yra konkretesnis. | IHC yra mažiau specifinis. |
Santrauka - imunofluorescencija ir imunohistochemija
Molekuliniai mechanizmai sukėlė daug pokyčių medicinos srityje, sukurdami pažangius molekulinių tyrimų metodus, kurie sukėlė revoliucijas diagnostikos srityje. Šie išradimai leido greitai ir tiksliai identifikuoti ir patvirtinti ligą, taip sudarant sąlygas sėkmingai skirti ir gaminti vaistus. Šie metodai taip pat naudojami farmakologijoje, siekiant rasti vaistų taikinius ir patvirtinti vaisto farmakokinetines savybes metabolizmo metu. IF ir IHC yra du diagnostiniai metodai, pagrįsti antigeno ir antikūno surišimo koncepcija, nors abiejų metodų aptikimo būdas skiriasi. IF antigenui aptikti naudoja fluorescencijos principą, o IHC - antigeno aptikimui - cheminio konjugavimo sąvoką. Tai yra skirtumas tarp IF ir IHC.
Atsisiųskite imunofluorescencijos ir imunohistochemijos PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia. Skirtumas tarp imunofluorescencijos ir imunohistochemijos.
