Pagrindinis skirtumas - situacijos hibridizacija ir imunohistochemija
Vėžio ir infekcinių ligų diagnostika yra populiari tendencija, kai nauji proteomika ir genomika pagrįsti metodai naudojami siekiant nustatyti navikus ar infekcines ląsteles, jų dauginimąsi ir ląstelių vystymosi vietas bei analizuoti daugumos užkrečiamųjų ir neužkrečiamųjų ligų genetinį pagrindą. Tai leis tiksliai apdoroti ir kurti vaistus bei sukurti pritaikytą ligų terapiją. Hibridizacija in situ (ISH) ir imunohistochemija (IHC) yra dvi tokios plačiai naudojamos vėžio biologijos metodikos, o pagrindinis skirtumas tarp hibridizacijos in situ ir imunochemijos slypi molekulėse, kurios naudojamos analizės procedūroje. ISH analizuojant naudojami nukleorūgščių zondai, tuo tarpu IHC diagnostiniams nustatymams naudojami monokloniniai ir polikloniniai antikūnai.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindinis skirtumas
2. Kas yra hibridizacija situacijoje
3. Kas yra imunohistochemija
4. Hibridizacijos situacijoje ir imunohistochemijos panašumai
5. Šoninis palyginimas - hibridizacija situacijoje ir imunohistochemija lentelių pavidalu
6. Santrauka
Kas yra situacijos hibridizacija (ISH)?
In situ hibridizacija yra nukleorūgščių hibridizacijos technika, kuri tiesiogiai atliekama audinio dalyje ar dalyje, visame audinyje arba ląstelėse. Metodas priklauso nuo Watson Crick papildomos bazės poravimo teorijos, dėl kurios gaunami arba DNR-DNR hibridai, arba DNR-RNR hibridai, kurie gali aptikti mutavusius genus arba nustatyti reikiamą dominantį geną. Hibridizacijos technikos metu kaip zondai naudojamos viengrandės DNR sekos, dvigubos grandinės DNR sekos, vienos grandinės RNR sekos arba sintetinės oligonukleotidų sekos, o šie zondai 5 'gale žymimi radioaktyviuoju fosforu identifikavimo procedūroms autoradiografijoje arba žymimi naudojant fluorescuojančius dažus.. Yra įvairių tipų ISH metodai, atsižvelgiant į naudojamo zondo tipą ir taikomą vizualizavimo technikos tipą.
01 pav. Fluorescuojanti hibridizacija situacijoje
Yra daugybė ISH taikymo būdų, daugiausia atliekant infekcinių ligų molekulinę diagnostiką, siekiant nustatyti patogenus ir patvirtinti patogeną per molekulinę diagnostiką. Jis taip pat naudojamas vystymosi biologijos, kariotipų ir filogenetinės analizės bei fizinio chromosomų kartografavimo srityse.
Kas yra imunohistochemija (IHC)?
IHC technikoje pagrindinė analizuojama molekulė yra antigenas. IHC metu monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami siekiant nustatyti antigenus esant infekcijai ar piktybinių ląstelių proliferacijos būklei. Metodas pagrįstas antigeno ir antikūno surišimu, o šiai technikai naudojamos fermentų etiketės; vienas iš tokių taikymų yra ELISA (imunofermentinis tyrimas, susijęs su fermentu). Žymekliai taip pat gali būti fluorescenciniai žymėti antikūnai arba radioaktyviai pažymėti antikūnai.
02 pav. Imunohistochemija
IHC plačiai naudojamas vėžinėms ląstelėms aptikti. Diagnostikos procedūros nukreiptos į antigenus, esančius naviko ląstelėse, siekiant nustatyti ir apibūdinti naviką. Ta pati procedūra taikoma diagnozuojant infekcinius agentus. Monokloniniai ir polikloniniai antikūnai taip pat naudojami analizuojant skirtingus genų produktus, įgalinant antikūno ir antigeno jungimosi reakciją tarp norimo baltymo ir skirto sintetinio antikūno.
Kokie yra situacijos hibridizacijos ir imunohistochemijos panašumai?
- ISH ir IHC yra labai specifinės reakcijos.
- Abi technikos yra labai tikslios.
- Abu metodai gali būti naudojami diagnozuojant vėžį ir infekcines ligas.
- Šie metodai atliekami sterilioje in vitro aplinkoje.
- Abu šie metodai yra greiti ir suteikia pakartojamų rezultatų.
- ISH ir IHC naudoja tokius aptikimo metodus kaip radijo žymėjimas ir fluorescencijos metodus.
Koks skirtumas tarp hibridizacijos situacijoje ir imunohistochemijos?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
In situ hibridizacija ir imunohistochemija |
|
| ISH yra nukleorūgščių hibridizavimo technika, kuri tiesiogiai atliekama audinio dalyje ar dalyje arba visame audinyje. | IHC yra technika, kai monokloniniai ir polikloniniai antikūnai naudojami siekiant nustatyti antigenus, kurie yra specialūs baltymų žymekliai, dedami ant ląstelių paviršių. |
| Analizuotų biomolekulių tipas | |
| ISH analizuoja nukleorūgštis. | IHC analizuoja baltymus-antigenus. |
| Biocheminės reakcijos pagrindas | |
| Taikant šią techniką, vyksta papildomos bazės poros tarp DNR-DNR arba DNR-RNR. | Antigeno ir antikūno sąveika yra susijusi su imunohistochemija. |
| Su fermentais susiję aptikimo metodai | |
| ISH negalima naudoti aptikimo su fermentais metodų. | IHC gali būti naudojami su fermentais susiję aptikimo metodai. |
Santrauka - situacijos hibridizacija ir imunohistochemija
Molekulinė diagnostika yra greiti ir patvirtinantys metodai, kuriuos galima naudoti norint nustatyti neužkrečiamą ligą, tokią kaip vėžys ar užkrečiama liga, tokia kaip ŽIV ar tuberkuliozė, remiantis ląstelėse esančiais molekuliniais žymenimis, kurie lemia ligos pasireiškimą. Molekuliniai žymenys gali būti ekspresuotų baltymų pavidalu arba genetiniu lygmeniu, pagal kurį diegiami skirtingi nauji metodai, siekiant padidinti efektyvumą ir yra mažiau darbštūs, nors šios technologijos yra brangios. Taigi ISH priklauso nuo DNR-DNR arba DNR-RNR hibridinio susidarymo, o IHC - nuo specifinių antikūnų ir antigeno reakcijų. Tai yra skirtumas tarp hibridizacijos in situ.
Atsisiųskite hibridizacijos situacijoje ir imunohistochemijos PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia. Skirtumas tarp hibridizacijos vietoje ir imunohistochemijos.
