Pagrindinis skirtumas - CFU ir MPN
Kolonijas formuojantis vienetas (CFU) ir labiausiai tikėtinas skaičius (MPN) yra du metodai, naudojami mikroorganizmams surašyti mėginiuose. Abu parametrai naudojami vandens mėginiams aptikti ir išmatų indikatoriaus bakterijoms. Kolonijas formuojantis vienetas yra matas, naudojamas surašyti gyvybingų bakterijų ląstelių ar grybelių ląstelių skaičių tam tikrame mėginio tūryje ar svoryje. Standartinis šio parametro vienetas yra CFU / ml arba CFU / g. Labiausiai tikėtinas skaičius yra dar vienas vienetas, naudojamas matuoti gyvybingų bakterijų ląstelių skaičių skystame mėginyje. Pagrindinis skirtumas tarp CFU ir MPN yra tas, kad CFU apskaičiuojamas iš bakterijų ir grybelių kolonijų, augančių ant kietos agaro plokštelės, o MPN - iš gyvybingų bakterijų, augančių skystoje terpėje.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra CFU
3. Kas yra MPN
4. Palyginimas greta - CFU ir MPN lentelės forma
5. Santrauka
Kas yra CFU?
Kolonijas formuojantis vienetas (CFU) yra parametras, kuriuo matuojamas gyvybingų bakterijų ar grybelių ląstelių skaičius tam tikrame mėginyje. Kolonijas sudarančių vienetų skaičiavimo metodas vadinamas standartiniu plokštelių skaičiumi. Gyvybingos kolonijos, atsirandančios ant agaro plokščių, išreiškiamos CFU / 1 ml (kolonijas formuojantis vienetas mililitre) skysčių mėginio arba CFU 1 g (kolonijas formuojantis vienetas vienam gramui) kietojo kūno mėginio.
Yra du įprasti metodai, naudojami mėginyje CFU matuoti. Jie yra skleidžiamų plokščių ir užpilamų plokščių metodas. Šiuos du metodus palaiko technika, vadinama serijiniu skiedimu. Serijos praskiesti mėginiai leidžia gauti daugybę kolonijų ant agaro paviršiaus. Žinomą mėginio tūrį galima paskleisti ant agaro plokštelės paviršiaus arba sumaišyti su agaru ir užpilti ant plokštelės. Po to plokštelė inkubuojama ir suskaičiuojamos atsiradusios kolonijos. Kolonijų skaičius yra susijęs su mikroorganizmų skaičiumi pradiniame mėginyje. Plokštės, kuriose yra per daug kolonijų arba per mažai kolonijų, neskaičiuojamos, nes rezultatai gali būti statistiškai netikslūs tose plokštelėse. Statistiškai geriausias diapazonas yra 30 - 300 kolonijų ant agaro plokštelės. Taigi, norint tiksliai surašyti, reikia pasirinkti tinkamas plokštes. Atliekant pirmiau minėtą funkciją, atliekamas serijinis skiedimas.
Suskaičiavus gyvybingų kolonijų skaičių plokštelėse, CFU / ml galima apskaičiuoti naudojant šią lygtį.
CFU / ml pradinio mėginio = kolonijų skaičius X plokštelės skiedimo koeficiente
Skiedimo koeficientas = (1 / plokštelės praskiedimas)
Pavyzdžiui, jei 10–4 skiedimo plokštelėje yra 149 kolonijos, bakterijų skaičių 1 ml pradinio mėginio galima apskaičiuoti taip:
CFU / ml = (149) x (1/10 -4)
= 149 × 10 4 arba 1490000
= 1. 49 x 10 6
01 pav. Kolonijų formavimo vienetas
Kas yra MPN?
Labiausiai tikėtinas skaičius yra alternatyvi CFU / ml priemonė. MPN taip pat įvertina gyvybingas skysto mėginio ląsteles. Jis skaičiuoja organizmus, augančius skystoje kultūroje, ir yra daugiausia bakteriologinė technika. Šis metodas yra ypač naudingas mėginiams, kuriuose yra maža bakterinių ląstelių koncentracija; pavyzdžiui, pienas, geriamasis vanduo ir kt. MPN vertė išreiškiama 100 ml tūrio. MPN remiasi statistiniu metodu, paremtu tikimybių teorija. Yra statistinės lentelės, skirtos rasti MPN vertes 100 ml mėginio. Šiose lentelėse rezultatai rodomi esant 95% patikimumo riboms.
MPN vertė apskaičiuojama atlikus metodą, vadinamą kelių vamzdžių fermentacijos metodu. Trys mėgintuvėlių rinkiniai, kuriuose yra tinkama terpė, yra užkrėsti trimis skirtingais mėginio tūriais, tokiais kaip 10 ml, 1 ml ir 0,1 ml, ir inkubuojami auginimui. Po inkubacinio laikotarpio mėgintuvėliai pažymimi + (teigiama) arba - (neigiama), ar nėra augimo. Tuomet teigiamų ir neigiamų rezultatų schema palyginama su MPN statistinių tikimybių lentele, siekiant įvertinti mikroorganizmų skaičių. Tada 100 ml mėginio nurodoma MPN vertė. MPN yra plačiai naudojamas koliforminėms bakterijoms, esančioms vandens mėginiuose, aptikti.
02 paveikslas: MPN lentelė
Kuo skiriasi CFU nuo MPN?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
CFU vs MPN |
|
| CFU yra priemonė, naudojama išreikšti gyvybingų bakterijų ar grybelių kolonijų skaičių tam tikrame mėginyje. | MPN yra alternatyvi CFU priemonė ir matuoja gyvybingų bakterijų ląstelių skaičių skystame mėginyje. |
| Vienetas | |
| CFU / ml arba CFU / g | MPN / 100 ml |
| Skaičiavimas | |
| CFU apskaičiuojamas suskaičiavus ant agaro plokštelių užaugintų kolonijų skaičių. | MPN apskaičiuojamas lyginant teigiamus ir neigiamus mėgintuvėlių modelius su MPN statistine lentele. |
| Serijinio skiedimo technika | |
| Prieš dedant mėginius ant agaro plokštelių, atliekamas serijinis skiedimas. | Serijinis skiedimas paprastai neatliekamas, kai apskaičiuojamas MPN |
| Metodai | |
| Skleistinių plokščių metodas ir liejimo plokštelių metodas yra dviejų tipų metodai, skirti gauti CFU. | Daugelio vamzdžių fermentacija yra metodas, naudojamas MPN vertei gauti. |
Santrauka - CFU ir MPN
Išmatuoti mikrobų augimą reikia dėl daugelio priežasčių. Maisto perdirbimo įmonėse būtina išmatuoti mikroorganizmų kiekį ir tipą maiste. Maisto pramonėje ir medicinoje būtina užtikrinti veiksmingą sterilizavimo gydymą. Nuotekų valymo įrenginiuose reikia reguliariai skaičiuoti mikrobus. Optimizuojant molekulinės biologijos procedūrą, reikia išmatuoti kolonijų skaičių plokštelėse. Taigi yra įvairių skaičiavimo ir augimo matavimo metodų. CFU ir MPN yra du tokie metodai, plačiai pritaikomi įvairiose srityse. CFU yra gyvybingų bakterijų ir grybelių kolonijų, esančių tam tikrame mėginyje, skaičiaus matas. Jis apskaičiuojamas taikant standartinį plokštelių skaičiavimo metodą arba perspektyvų plokštelių skaičiavimo metodą. MPN yra dar viena priemonė, išreiškianti bakterijų ląstelių skaičių tam tikrame skysto mėginio tūryje. Jis apskaičiuojamas naudojant kelių mėgintuvėlių fermentacijos metodą ir MPN lentelę. Tai yra skirtumas tarp CFU ir MPN.
Atsisiųskite CFU ir MPN PDF versiją
Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatų pastabose. Atsisiųskite PDF versiją čia Skirtumas tarp CFU ir MPN.
