Pagrindinis skirtumas - transformantai ir rekombinantai
Rekombinacija ir transformacija yra du esminiai genų inžinerijos etapai, kai organizmo savybės sąmoningai modifikuojamos manipuliuojant jo genetine medžiaga. Rekombinacija yra procesas, kurio metu svetima DNR įtraukiama į vektorinį genomą ir susidaro rekombinantinė DNR molekulė. Transformacija yra kitas žingsnis, kai rekombinantinė molekulė patenka į organizmą-šeimininką. Ląstelė-šeimininkė arba organizmas palengvina rekombinantinės molekulės ekspresiją. Esminis skirtumas tarp transformantų ir rekombinantų yra tas, kad transformantai yra ląstelės arba organizmai, kurie viduje užima rekombinantinę molekulę ir palengvina ekspresiją, o rekombinantai yra vektoriai, leidžiantys įterpti svetimą DNR į jos genomą ir pernešti į transformuojančius šeimininkus ekspresijai.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra transformatoriai
3. Kas yra rekombinantai
4. Palyginimas greta - transformantai ir rekombinantai
5. Santrauka
Kas yra transformantai?
Transformantai yra ląstelės arba organizmai, kuriuose ekspresijai imama rekombinantinė DNR. Bakterijos genų inžinerijoje dažniausiai naudojamos kaip organizmai-šeimininkai, nes laboratorijos sąlygomis jas lengva auginti, daugintis ir tvarkyti, o transformacijos procesas yra lengvas, palyginti su kitais organizmais. Populiariausia šeimininkų bakterija, naudojama genų inžinerijoje, yra E coli bakterija.
Transformacijos proceso metu ląstelės šeimininkės skatinamos priimti rekombinantus. Tačiau kai kurios ląstelės šeimininkės neužima rekombinantinių molekulių. Jie yra žinomi kaip netransformantai, o ląstelės, kuriose yra rekombinantinių DNR molekulių, yra žinomos kaip transformantai. Transformantų pasirinkimas iš netransformuojančių medžiagų atliekamas naudojant pasirenkamus žymenis molekulinėje biologijoje. Pasirenkami žymekliai įterpiami į vektorinį genomą kartu su DNR intarpu. Dažniausiai naudojami pasirenkami žymenys yra atsparūs antibiotikams genai. Markeriniai genai palengvina transformantų diferenciaciją ir tęsia procesą. Po transformacijos proceso bakterija auginama terpėje, kurioje yra antibiotikų. Tik transformantai gali augti toje terpėje, nes jie turi rekombinantų viduje.
Kai rekombinantinė DNR molekulė transformuojama organizmo-šeimininko viduje, svetima DNR gali būti integruota į ląstelės-šeimininkės genomą arba likti neintegruota citoplazmoje. Tačiau svetimos DNR ekspresija ir replikacija vyksta organizme-šeimininke ir duoda norimą proceso rezultatą.
Kas yra rekombinantai?
Rekombinantas yra organizmas arba ląstelė, turintis rekombinuotą genomą, kuriame yra svetimos DNR. Rekombinantai yra genų inžinerijos proceso rezultatas. Jie dirbtinai konstruojami in vitro, įterpiant dominančius genus ir modifikuojant genomą. Dažnai bakterijų plazmidės ir bakteriofagai veikia kaip rekombinantai genų inžinerijoje. Jis turi skirtingų DNR chimerą. Rekombinantinė DNR molekulė perneša svetimą DNR į organizmą-šeimininką ir priverčia jį ekspresuoti bei suformuoti norimą produktą.
Rekombinantinės molekulės sukonstruojamos naudojant restrikcijos endonukleazes ir DNR ligazes. Norimas DNR fragmentas atskiriamas nuo pirminio organizmo ir įterpiamas į vektorių, kad gautų rekombinantą transformacijai. Susidomėjusio geno pjovimas ir vektoriaus organizmo atidarymas turėtų būti atliekamas naudojant tą patį restrikcijos fermentą, kad būtų sukurti suderinami lipnūs galai, kurie sujungtų juos. Kai svetima DNR įtraukiama į vektorinį genomą, ji yra žinoma kaip rekombinantinė arba rekombinantinė DNR molekulė.
02 paveikslas: Rekombinantinė DNR
Kuo skiriasi transformantai ir rekombinantai?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
Transformantai ir rekombinantai |
|
| Transformantai yra ląstelės, kurių viduje yra rekombinantinė DNR molekulė. | Rekombinantai yra nešančiosios molekulės, kurių svetima DNR yra įterpta į savo genomą. |
| Užsienio DNR išraiška | |
| Jos yra ląstelės-šeimininkės, galinčios ekspresuoti rekombinantinę DNR. | Jie turėtų sugebėti savarankiškai daugintis organizme-šeimininke. |
| Pasirinkimas | |
| Ląstelės, kurias galima lengvai užauginti ir daugintis, parenkamos kaip ląstelės-šeimininkės. | Jie turi būti lengvai ištraukiami ir juose turėtų būti pasirenkami žymekliai. |
Santrauka - Transformantai ir rekombinantai
Transformantai yra ląstelės arba organizmai, kurių viduje yra rekombinantinės DNR molekulės. Rekombinantai yra organizmai ar ląstelės, kurios buvo genetiškai rekombinuotos ir kurių genomuose yra svetimos DNR. Bakterijų ląstelės dažnai naudojamos kaip ląstelės šeimininkės transformacijai, o plazmidės ir bakteriofagai dažnai naudojami kaip vektoriai rekombinantinėje DNR technologijoje. Tai yra skirtumas tarp transformantų ir rekombinantų.
