Pagrindinis skirtumas - YAC ir BAC vektoriai
Vektoriai naudojami molekuliniam klonavimui. Vektorius gali būti apibrėžiamas kaip DNR molekulė, kuri elgiasi kaip priemonė pernešti svetimą genetinę medžiagą į kitą ląstelę. Vektorius, kuriame yra svetimos DNR, yra žinomas kaip rekombinantinė DNR, ir jis turėtų sugebėti jį daugintis ir ekspresuoti organizme-šeimininke. Mielių dirbtinė chromosoma (YAC) ir bakterinė dirbtinė chromosoma (BAC) yra dviejų tipų vektoriai, susiję su klonavimu. Pagrindinis skirtumas tarp YAC ir BAC yra tas, kad YAC yra dirbtinai sukonstruota vektorių sistema, naudojant specifinį mielių chromosomos regioną, kad į mielių ląsteles būtų įterpti dideli genetinių medžiagų segmentai, o BAC yra dirbtinai sukonstruota vektorių sistema, naudojant specifinį E. coli chromosomos regioną. į E. coli ląsteles įterpti didelius DNR segmentus.
TURINYS
1. Apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra YAC vektoriai
3. Kas yra BAC vektoriai
4. Palyginimas kartu - YAC ir BAC vektoriai
5. Santrauka
Kas yra YAC vektoriai?
YAC (mielių dirbtinė chromosoma) yra dirbtinai sukurta chromosoma, galinti pernešti didelį kiekį svetimos DNR ir daugintis mielių ląstelėse. Jis turi centromerą, telomerus, taip pat autonomiškai replikuojančias sekas, kurios yra būtinos replikacijai ir stabilumui. YAC taip pat turėtų turėti selektyvų žymeklį arba žymenis ir restrikcijos vietas, kad jis taptų efektyviu klonavimo vektoriu. Didelę seką nuo 1000 kb iki 2000 kb galima įterpti į YAC ir perkelti į mieles. YAC transformacijos efektyvumas yra labai mažas.
01 paveikslas: YAC vektorius
Kas yra BAC vektoriai?
Dirbtinė bakterijų chromosoma (BAC) yra dirbtinai sukonstruota chromosoma molekuliniam klonavimui. Jame yra specifiniai E. coli F plazmidės regionai, jis yra apskritas ir labai suvyniotas. BAC yra sukurtas klonuoti DNR fragmentus prie bakterijų, ypač į E. coli. Jis gali turėti DNR fragmentus, kurių dydis yra iki 300 kb. Palyginti su YAC, BAC klonavimo intarpai yra mažesnio dydžio. BAC buvo sukurta 1992 m. Ir vis dar yra populiari dėl savo stabilumo ir paprastos konstrukcijos. BAC yra naudingi ir kuriant vakcinas.
02 paveikslas: BAC vektorius molekuliniame klonavime
Kuo skiriasi YAC ir BAC vektoriai?
Skirtingas straipsnis viduryje prieš lentelę
YAC ir BAC vektoriai |
|
| YAC yra genų inžinerijos būdu sukurta chromosoma, kurios klonavimui naudojamas mielių DNR. | BAC yra genų inžinerijos būdu sukurta DNR molekulė, klonavimui naudojama E. coli DNR. |
| Lytis | |
| YAC buvo sukurti klonuoti didelius genomo DNR fragmentus į mieles. | BAC buvo sukurti dideliems genomo fragmentams klonuoti į Escherichia coli. |
| Įterpimo ilgis | |
| YAC gali būti megabazės dydžio genomo intarpai. (1000 kb - 2000 kb). | BAC gali turėti 200–300 kb ar mažesnius įdėklus. |
| Statyba | |
| YAC DNR sunku išvalyti nepažeistą, todėl norint sukurti YAC vektorių sistemą, reikia didelės koncentracijos. | BAC yra lengvai valomas nepažeistas ir lengvai sukonstruojamas. |
| Chimerizmas | |
| YAC dažnai būna chimeriški. | BAC yra retai chimerinis. |
| Stabilumas | |
| YAC yra nestabilus. | BAC yra stabilus. |
| Modifikacijos | |
| Mielių rekombinacija yra labai įmanoma ir visada išlieka aktyvi. Taigi jis gali generuoti ištrynimus ir kitus pertvarkymus YAC. | Užkirsti kelią E. coli rekombinacijai ir prireikus įjungti. Taigi, tai sumažina nepageidaujamus BAC pertvarkymus. |
| Priežiūra | |
| Manipuliuojant rekombinantiniais YAC paprastai reikia perkelti YAC į E. coli vėlesniam manipuliavimui. Vadinasi, tai yra sunkus procesas. | BAC modifikacija vyksta tiesiogiai E. coli. Taigi DNR perduoti nereikia. Taigi procesas nėra varginantis. |
Santrauka - YAC ir BAC vektoriai
YAC tapo pagrindine klonavimo procesų tyrimo priemone dėl savo sugebėjimo klonuoti didelius DNR fragmentus į organizmą-šeimininką. Tačiau YAC turi keletą trūkumų, tokių kaip vektoriai, tokie kaip statybos sunkumai, chimerizmas, nestabilumas ir kt. Todėl, norėdami įveikti šias problemas, mokslininkai sukūrė BAC vektorius. BAC buvo sukonstruotas naudojant specifinius E. coli chromosomos regionus. Tai yra stabilus vektorius ir lengvai sukonstruojamas. Tačiau DNR, kurią BAC gali apdoroti, ilgis yra iki 20 kartų mažesnis nei YAC. Tai yra skirtumas tarp YAC ir BAC vektorių sistemų. Šiais laikais laboratorijose labiau mėgstama BAC, o ne YAC.
